液相色谱仪输液泵的使用方法及注意事项
输液泵是高效液相色谱仪系统中比较重要的部件之一,它主要作用是将流动相匀速注入液相色谱系统中,形成稳定的流路。泵的性能好坏会直接影响到分析过程速率以及分析结果的准确性。一般而言,输液泵应具备流量稳定、输出压力高、密封性好等性能。
泵的种类很多,按输液性质可分为恒压泵和恒流泵。恒流泵按结构又可分为螺旋注射泵、柱塞往复泵和隔膜往复泵。恒压泵受柱阻影响,流量不稳定;螺旋泵缸体太大,这两种泵已被淘汰。目前应用最多的是柱塞往复泵。
柱塞往复泵的液缸容积小,因此易于清洗和更换流动相,特别适合于再循环和梯度洗脱;改变电机转速能方便地调节流量,流量不受柱阻影响。其主要缺点是输出的脉冲性较大,现多采用双泵系统来克服。
为了保证输液泵输液的稳定性,在使用液相色谱仪输液泵过程中应当注意问题如下:
①防止任何固体微粒进入泵体,因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的固体微粒杂质。流动相的预处理方法是使用溶剂过滤器进行过滤除杂。除此之外,输液泵的滤器应经常清洗或更换。
②流动相不应含有任何腐蚀性物质,含有缓冲液的流动相不应保留在泵内,尤其是在停泵过夜或更长时间的情况下。如果将含缓冲液的流动相留在泵内,由于蒸发或泄漏,甚至只是由于溶液的静置,就可能析出盐的微细晶体,这些晶体将和上述固体微粒一样损坏密封环和柱塞等。因此,必须泵入纯水将泵充分清洗后,再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂(对于反相键合硅胶固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
③泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完,否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环,最终产生漏液。
④输液泵的工作压力决不要超过规定的**压力,否则会使高压密封环变形,产生漏液。
⑤流动相应该先脱气,流动相脱气最简单的方法是使用超声波清洗机进行超声波处理。气泡进入泵内,会使泵发生空转,磨损泵,并且会影响流量的稳定性。
如果泵在液相色谱仪分析检测过程中出现异常,迎淡季时排除,输液泵常见问题以及故障排除方法如下:
①没有流动相流出,又无压力指示。原因可能是泵内有大量气体,这时可打开泄压阀,使泵在较大流量(如5ml/min)下运转,将气泡排尽,也可用一个50ml针筒在泵出口处帮助抽出气体。另一个可能原因是密封环磨损,需更换。
②压力和流量不稳。原因可能是气泡,需要排除;或者是单向阀内有异物,可卸下单向阀,浸入丙酮内超声清洗。有时可能是砂滤棒内有气泡,或被盐的微细晶粒或滋生的微生物部分堵塞,这时,可卸下砂滤棒浸入流动相内超声除气泡,或将砂滤棒浸入稀酸(如4mol/L硝酸)内迅速除去微生物,或将盐溶解,再立即清洗。
③压力过高的原因是管路被堵塞,需要清除和清洗。压力降低的原因则可能是管路有泄漏。检查堵塞或泄漏时应逐段进行。
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