液相色谱—质谱(GC—MS)联用检测方法
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液相色谱—质谱(GC—MS)联用检测方法

质谱法是通过制备、分离、检测离子来鉴定化合物的一种专门技术,质谱法在一次分析中可提供丰富的结构信息,灵敏度极高。因此,常与气相色谱仪和液相色谱仪等分析仪器联用,大大提高了检测速率和检测结果的准确性。

一般来说,在300℃左右能汽化的样品,主要采用气相色谱—质谱(GC-MS)联用仪进行分析,因为GC-MS使用EI源,得到的质谱信息多,毛细管柱的分离效果也好;如果在300℃左右不能汽化的生物大分子化合物,则需要用液相色谱—质谱(LC-MS)分析。

    液相色谱—质谱(LC—MS)联用技术是近年来发展而成的一种**检测分析方法。液相色谱仪和质谱仪连接检测采用了大气压电离(API)技术,其中电离源有两种,分别是大气压电喷雾电离源(ESI)和大气压化学电离源(APCI)。

    电喷雾(ESI)的工作原理是:电喷雾电离(ESI)是在液滴变成蒸汽,产生离子发射的过程中形成的,溶剂由液相泵输送到ESI Probe,经其内的不锈钢毛细管流出,这时给毛细管加2-4kv的高压,由于高压和雾化气的作用,流动相从毛细管顶端流出时,会形成扇状喷雾,使液滴生成含样品和溶剂离子的气溶胶。

    大气压化学电离 (APCI)工作原理是:APCI电离是在大气压条件下利用**高压(电晕)放电促使溶剂和其他反应物电离、碰撞,及电荷转移等方式,形成一个反应气等离子区,样品分子通过等离子区时,发生质子转移,形成了(M+H) 或(M-H)离子或加和离子。

    那么,ESI与 APCI在使用过程中有何不同呢?

    (1)原理上:APCI利用电晕放电离子化,气相离子化,即样品先形成雾,然后电晕放电针对其放电,在高压电弧中,样品被电离,然后去溶剂化形成离子,**检测;ESI利用离子蒸发,液相离子化,即样品先带电再喷雾,带电液滴在去溶剂化过程中形成样品离子,从而被检测。

    (2)适用范围:APCI 使用于中等极性,小分子化合物,且具有一定的挥发性;而ESI 易形成多电荷离子,因而可测大分子,主要使用于极性化合物和生物大分子。

    (3)多电荷:APCI不能生成一系列多电荷离子,所以不适合分析大分子。ESI 能生成一系列多电荷离子,特别适用于蛋白,多肽类等生物分子。

    (4)电离程度:ESI 的软电离程度较APCI 的还小,但其应用范围较APCI 的大,只有少部分ESI 做不出,可以用APCI 辅助解决问题,但是APCI还是不能解决所有ESI 解决不了的问题。

液相色谱—质谱(GC—MS)联用的热喷雾方式的特点如下:

   (1)直接热喷雾电离产生的样品离子一般为质子化的离子或所加阳离子与样品分子的合成离子,如(M十H)+,(M十NH4)+等。这种电离方式比化学电离温和,谱图往往有较强的准分子离子。因而更适用于难汽化和热不稳定样品的分子;

   (2)能满足一船液相色谱流量要求,****的水也能分析;

   (3)有良好的色谱分辨率,灵敏度等于或优于传送带方式;

   (4)需加入电解质,操作麻烦,结构信息少,适合于四极质谱而不适合于磁质谱。以上两种联接装置,虽然使液相色谱和质谱的联用成为可能,但都有不足之处。

 

 

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