载体构建(vectorconstruction)是把连接好的DNA分子运送到受体细胞中去。首先,必须寻找一种能进入细胞、在装载了外来的DNA片段后仍能照样复制的运载体。理想的运载体是质粒(plasmid),在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。当给质粒插入一段外源DNA片段后,它依然能够进行自我复制。 载体构建是分子生物学研究常用的手段之一。
我们在载体构建上有丰富的经验,提供各种载体构建服务,包括常规的蛋白表达载体(大肠杆菌、酵母、昆虫、哺乳动物)的构建,报告基因载体,启动子、增强子等功能基因验证载体,miRNA、siRNA、shRNA功能验证载体、腺病毒包装载体、慢病毒包装载体等载体构建是分子生物学研究中最常用到的手段之一。但由于影响因素较多,对研究者经验要求较高,因而往往费时费力。我公司凭借长期分子生物学工作的丰富经验,集中人力,为您提供高效、快捷的服务。可根据已有载体进行改造方案的设计,完成现有载体不同功能元件的改造,也可以应客户要求将指定片段亚克隆至各载体。
★服务内容:
1) 为客户构建或改造特定的载体,将目的基因装载到特定的载体上。
2) 已有载体多克隆位点(MCS)的改造;启动子、增强子、筛选标志物等功能元件的改造。
★您需要提供的信息
1) 克隆要求及相关的实验材料,图谱,以及构建方案。克隆完成后如需测序并且要求序列完全匹配,则需提供全序列。
2) 载体改造的具体要求,预进行改造的质粒(序列经测序验证正确)及其图谱和序列,能够获得所需元件或基因的模板(质粒或其它)及其相关图谱和序列。
3) 对于载体改造和基因片段克隆,客户需要提供载体、PCR产物或酶切产物、以及载体来源及基因背景资料等。
4) 对于表达载体、报道基因载体与病毒载体的构建,您需要提供含有目的基因的质粒或cDNA克隆模板、序列资料、目标蛋白的基因序列与酶切位点、以及载体等资料。
5) 若客户只提供组织或细胞样本,请提供所需克隆基因的NCBI登录号或电子版全序列。
6) 客户自带的载体需提供详细的酶切图谱及相关信息。
★服务周期
服务项目 | 实验周期 |
普通载体构建 | 2周起,看具体改变的基因元件数量 |
基因表达载体构建(<500bp) | 2周起,看具体改变的基因元件数量 |
基因表达载体构建(500bp-2000bp) | 2周起,看具体改变的基因元件数量 |
基因表达载体构建(>2000bp) | 2周起,看具体改变的基因元件数量 |
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