在单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞的筛选和鉴别是最重要的步骤。首先需要筛选出正确融合的杂交瘤细胞，再筛选出能分泌目标抗体的杂交瘤细胞，最终将筛选出来的杂交瘤细胞进行扩大培养，制备大量单克隆抗体。在进行能分泌目标抗体杂交瘤细胞的筛选时，需要鉴定这类杂交瘤细胞培养上清液中单克隆抗体的类或亚类，最常用的是ELISA法，因其快速、简便、灵敏度高、特异性强、易于标准化等优点，已得到广泛应用。

DNA甲基化修饰作为一种重要的表观遗传修饰, 能通过影响染色质结构, DNA构象、稳定性以及与蛋白质相互作用方式等, 起到调控基因表达的作用。在正常的生理条件以及一些疾病发生过程中均起着重要作用。DNA 甲基化是一种常见的表观遗传修饰, 由DNA甲基转移酶(DNA methyl-transferase, Dnmt) 催化, 以S-腺苷甲硫氨酸(SAM) 作为甲基供体而发生反应。催化反应有3 类类型, 包括将腺嘌呤转变为N-甲基腺嘌呤、将胞嘧啶转变为N- 甲基胞嘧啶以及将胞嘧啶转变为C-甲基胞嘧啶。原核生物中这3种类型均存在, 但是在高等真核生物中只存在第3种类型, 即将胞嘧啶(C) 转变为5-甲基胞嘧啶(5mC)。

如何检测单个基因的甲基化水平？

近些年来, 表观遗传学领域发展迅速, 相关研究方兴未艾。其中一个非常重要的部分就是DNA甲基化修饰。目前通用的检测方案是利用亚硫酸盐修饰的方法。使用亚硫酸盐将未甲基化的胞嘧啶（C）转化为尿嘧啶（U），而甲基化的胞嘧啶不受任何影响。然后，再通过设计特异性的甲基化引物，进行MS-PCR扩增或者亚硫酸盐测序实验，从而达到检测单个基因甲基化水平的目的。

为什么推荐BisulFlash DNA甲基化修饰试剂盒？

目前，市面上的DNA亚硫酸盐修饰试剂盒，整个操作实验长达2-8小时不等，有的甚至长达16小时，大大延长了客户的实验操作时间；而且转化效率**只有接近99%，同时错误转化率也高达3%；另外，在操作过程中也会造成不同程度的DNA降解，因此要求起始的DNA量要高达1ng左右，限制了某些样本的处理。

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