改良大肠杆菌O157显色培养基使用说明书

此培养基用于大肠杆菌O157的分离和鉴定。

一、组分

琼脂              15.0g/L

蛋白胨、酵母粉    13.0g/L

色素              1.2g/L

添加剂 A          1瓶

添加剂 B          1瓶

pH                7.0±0.2

二、操作

1.       称取瓶内干粉，用1000ml蒸馏水或纯水溶解，可按29.2g/L的比例扩大或缩小。

2.       上述干粉缓慢倒入蒸馏水中，充分搅拌溶解。

3.       加热至100℃,并按常规不断搅拌。如果用高压灭菌锅，不要加压，加热不能超过100℃，混合物也可以在微波炉内加热，使用微波炉加热时，煮沸后立即移出微波炉并不断搅拌，而后移入微波炉再加热，直至完全溶解（大气泡代替泡沫产生，大约需要2分钟）。

4.       冷却至45-50℃，待用。

5.       在添加剂A中加入1ml无菌水和在添加剂B中加入1ml95％乙醇，放置在37℃水浴加热10分钟，轻轻摇动待内容物全部溶解方可使用。然后以无菌手续分别加入到培养基中，轻轻混匀。（添加剂A和B各1ml，可用于1000ml培养基，可按比例放大或缩小，剩余的添加剂可以保存在－20℃冰箱中，有效期半年），然后把混匀的培养基倾入培养皿或试管。

三、贮存

1.添加剂A和B，4℃保存，有效期一年。

2.干粉保存在15-30℃环境下。倾注好的培养基在室温可保存1天，4℃冰箱中可贮存两星期。

四、结果

划线接种（如果培养基刚从冰箱中取出，要恢复至室温后才能使用），37℃培养24小时。

★  建议通过乳胶试验验证可疑菌落。