荧光定量 PCR 服务介绍
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实验介绍:

实时定量PCR (real-time quantitative PCR) 是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量,并据此推断目的基因的初始量,不需要取出PCR产物进行分离。目前实时定量PCR 作为一个极有效的实验方法,已被广泛地应用于分子生物学研究的各个领域。

SYBR Green(荧光染料掺入法):
     
PCR反应体系中,加入SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA 双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
      SYBR Green法进行基因定量检测实验设计简单,不需要设计探针即可快速进行基因定量,且能够进行熔点曲线分析,检验扩增反应的特异性,成本低,通用性好,使用比较普遍。

 

 

TaqmanProbe (探针法):
      PCR 扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一段寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时, 报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测 系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

 

              绝对定量:分析未知样本中某个基因的绝对量值,即通常所说的拷贝数。需构建标准品(已知拷贝数的DNA)。        相对定量:分析未知样本与对照样本中某个基因表达相对变化。需确定内参基因(表达量或拷贝数恒定的基因)。  

 

服务内容:

1. 根据基因序列设计特异性的引物和荧光探针;

2. 提取样品的RNA/DNA,并反转录成cDNA;

3. Real-Time PCR,进行实验结果分析;

4. 提供完整的实验报告。

您需要提供的信息

1. 请您提供新鲜的且足量的材料,或直接提供纯化好的总RNA或DNA(大于5ug/样品);

2. 提供已知的全长基因序列, GeneID,详细背景资料,DNA/RNA 来源、丰度等。

服务价格 报价(一)

服务

单价()

备注

RNA 提取反转录

150/样品

 

引物设计合成

150/对引物

 

预实验

500/基因

 

检测费

150/基因/样品

 

生物信息学分析

1500/项目

 

 

报价(二)

服务

单价

引物设计合成

150/对引物

QPCR

210/基因

 

备注:5 个基因以下利用报价(一)

           5-10 个基因采用报价(二),10 个基因以上询价绝对定量

标准品构建 1200

注意:每个样本检测需要 3 个重复。

服务周期

小于 15 个样本包括 RNA 提取、反转录、引物验证实验完成我们需要至少 15 个工作日。

大于 15 个样本根据具体情况而定。

客户须知

1. 请保证提供信息的准确性,如因信息问题实验失败,后果由客户承担;

2. 如提供提取完成的RNA/DNA要保证符合我们实验的标准 。

服务承诺

1. 本公司会在最短的时间内快速将实验完成;

2. 本公司会为您提供详细的报告,报告提供的内容完全可以满足你论文或是写文章的需要;

3. 本公司保证检测结果准确、客观、可信,但不能确保一定要得到某特定结果。

 


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统一社会信用代码91110106053574198Y
成立日期2012年09月14日
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更新时间:2020-04-17
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