1. 对于组织切片或蛋白质印记膜，在与辣根过氧化物酶（hrp）标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5分钟。

2. 取900ul pbs（或双蒸水），加入50ul溶液a，50ul溶液b混合均匀，即配成dab工作液。 如需要更大体积工作液，可按比例放大。此溶液必须现用现配，配好后避光保存，1小时内使用，过期后请将剩余的液体废弃。

3. 向组织切片或膜上加入适量dab工作液，确保能充分覆盖样品。

4. 室温避光孵育3-10 分钟或更长时间，避免光照，直至显色至预期深浅。

5. 去除dab染色工作液，用蒸馏水洗涤2-3次即可终止显色反应。

6. 对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后，可对其进行其他染料复染。对于膜，显色反应终止后，可以室温晾干避光保存。
注意事项：

1．dab溶液应低温密封保存。如有结晶析出，应确保结晶完全溶解再行使用； 

2．显色工作液应现用现配，新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色，如颜色过深，请勿使用； 

3．显色时间严格控制，根据情况调整，以免显色过度。固相膜显色数小时后即会褪色，不能**存在； 

4．dab为可疑致癌物，请采取必要的防范措施。操作时应戴手套，尽量避免与皮肤接触，用后及时彻底冲洗，接触dab的实验用品**经洗液浸泡24h后使用。

*important note: thisproduct as supplied is intended for research use only, not for usein human, therapeutic or diagnosticapplications.

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