1. 工作液配制：

取850ul 无菌双蒸水，依次加入 50ul 溶液A、50 ul溶液B 、50ul 溶液C 、混合均匀，即配成 AEC工作液。如需要更大体积工作液，可按相应比例放大。此溶液必须现用现配，配好后避光保存，半小时内使用，过期后请将剩余的液体废弃。

2.  显色：

1 ）蛋白质印迹膜显色：将配制好的工作液滴加在印迹膜上（或将印迹膜浸入AEC 工作液中），显色时间一般为10-30min。显色完毕后，将膜浸入蒸馏水中，终止反应。

2 ）组织切片染色：向组织切片上加入适量 AEC 工作液，确保能充分覆盖样品。室温孵育 10-30min，避免光照，直至显色至预期深浅。可在显微镜下观察控制显色时间。显色后用蒸馏水洗涤即可终止显色反应。 

3 ）对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后，可对其进行其他染料复染。对于膜，显色反应终止后，可以室温晾干避光保存。
注意事项：

1. 由于AEC 生成的颜色产物为脂溶性，因此用于IHC显色后不适合梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，须用水性封片剂封片。

2. 根据情况自行优化实验条件，调整显色时间，获得**显色效果。

3.  AEC 有一定毒性，操作时请采取必要的防护措施。

*Important Note: Thisproduct as supplied is intended for research use only, not for usein human, therapeutic or diagnosticapplications.

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